哎，你是不是每次做实验遇到PDA培养基复溶就头大？明明跟着步骤走，结果不是结块就是灭菌不彻底？别慌！今天咱们就唠一唠这个让新手小白“又爱又恨”的PDA复溶，手把手教你避开那些坑，保证看完能让你从“翻车专业户”变成“实验室一哥/一姐”！

一、PDA复溶的正确姿势：照着做，包你稳！

??先划重点：PDA培养基说白了就是土豆淀粉+葡萄糖+琼脂的混合物，用来养真菌、细菌的“高级盒饭”??。复溶说白了就是把这堆干粉变成液态培养基的过程，但细节决定成败啊兄弟们！

1. 准备工作：别急着动手，先看清单！

• ??材料清单??：PDA干粉、蒸馏水（千万别用自来水！）、烧杯、玻璃棒、灭菌锅、天平（精度至少0.1g）。
• ??口头禅警告??：缺了蒸馏水？赶紧去隔壁实验室借！自来水里的氯分分钟把培养基搞废！

2. 称量&溶解：手别抖，水温要控好！

• ??步骤拆解??：
  1. ??称量干粉??：按说明书比例（通常是每升水加39g），用天平精确称量。新手建议用100ml小批量练手，别贪多！
  2. ??加水搅拌??：先倒一半蒸馏水到烧杯，边撒干粉边用玻璃棒画圈搅拌。??重点来了！水温最好控制在50℃左右，太凉搅不匀，太热琼脂提前凝固??！
  3. ??补足水量??：干粉全溶后，再加剩下的水，搅到完全透明无颗粒。如果还有小疙瘩，隔水加热到80℃继续搅，但千万别煮沸！

??举个栗子??：上次实验室小王急着下班，水温飙到70℃直接倒粉，结果烧杯底糊了一层“土豆锅巴”，被导师念叨了一星期…

二、灭菌&保存：高温不是万能，时间也要卡死！

1. 高压灭菌：121℃是底线，多一秒都危险！

• ??参数必背??：
  • ??温度??：121℃（低于这数？细菌孢子笑开花！）
  • ??时间??：20分钟（新手设个手机闹钟，别指望脑子记！）
  • ??水量??：灭菌锅加水到刻度线，少了会干烧，多了浪费电！

??血泪教训??：隔壁组的小李灭菌时偷偷调成115℃，结果培养皿长满杂菌，数据全废…导师原话：“你这不叫实验，叫养蛊！”

2. 灭菌后操作：手速要快，姿势要帅！

• ??趁热倒平板??：灭菌完立马把培养基倒进无菌培养皿，冷却到45℃左右（手感微烫但不烫手）时最合适。??放凉了变果冻？拿回去重新水浴加热！??
• ??保存技巧??：暂时不用的培养基，用封口膜包好倒置放4℃冰箱，最多存2周。??千万别学某些人放室温，三天就长毛给你看！??

三、常见问题急救包：遇到状况别慌，对症下药！

Q1：??培养基里有絮状沉淀，还能用吗？??

→ 大概率是琼脂没溶透！补救方法：重新加热到80℃搅拌，灭菌后再用。??但要是已经灭菌过了…别挣扎了，重配吧！??

Q2：??灭菌后颜色变深，是不是坏了？??

→ 别紧张！高温下葡萄糖轻微焦化会变浅棕色，不影响使用。??但如果变成酱油色或发黑…兄弟，你灭菌时间超了吧？??

Q3：??倒平板时总凝固太快怎么办？??

→ 水温控低了呗！下次把培养皿提前预热到50℃，或者在水浴锅里保温。??实在不行，练练麒麟臂，10秒内倒完！??

四、个人私货时间：有些话导师懒得说，但我必须讲！

??观点1：称量不准？不如不做实验！??
见过太多人随手一勺PDA干粉就开干，结果真菌要么饿死要么撑死。??实验室不是厨房，电子天平才是你亲爹！??

??观点2：灭菌锅不是微波炉，别动不动“叮”一下！??
高温灭菌是为了杀灭耐热孢子，随便缩短时间等于给杂菌留后门。??记住：121℃是底线，20分钟是标配，多一分钟都不行！??

??观点3：失败是常态，但同一个坑别踩两次！??
培养基做毁了？太正常了！我当年连着翻车三次才摸清门道。??关键是每次都要记下问题：水温多少？搅拌多久？灭菌参数对不对？??

好了，唠了这么多，最后说句掏心窝的话：??PDA复溶真没啥高深技术，就是个体力活+耐心活??。别怕麻烦，多试几次，等你练到“闭着眼都能配”的时候…嘿嘿，记得请隔壁桌的师弟师妹喝奶茶啊！